独一味

首页 » 常识 » 诊断 » 10快速转膜液说明书
TUhjnbcbe - 2023/11/5 21:11:00
白颠凤怎么治 http://disease.39.net/bjzkbdfyy/170909/5686247.html

货号:abs

快速转膜液使用独特配方,能高效快速地将蛋白转移到印迹膜(PVDF或硝纤膜)上。使用湿转法(Tankblot)或半干转法(Semi-dryblot)方法,能在15-35分钟内完成转膜过程。

产品特点:

1、快速和环保:快速转膜液不使用甲醇,减轻了对实验者和环境的伤害。

2、兼容性好:快速转膜液能兼容Laemmli胶,预制胶,Bis-Tris胶等多种凝胶。

3、转移效率高:快速转膜液对分子量跨度较大的蛋白也有很好的转移效率,有效解决了大小蛋白不能在同一张膜上同时转移的问题。

浓度:10×

使用方法:

转膜前的准备:

5-6张裁好的滤纸;裁好的转印膜;足够的1×快速转移buffer

一、湿转法(Tankblot):

1、按照下表配制1×快速转膜液

2、将滤纸和海绵浸泡在1×快速转膜液中,完全浸湿。

3、将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2分钟,去除胶表面的SDS;随后将凝胶浸泡在1×快速转膜液中。

注意:水中漂洗时间一定不能超过2分钟,否则分子量较大的蛋白不能完全转移。

4、按照以下顺序做好转印三明治结构:

负极(阴极)

一块海绵

2mm滤纸

凝胶

转印膜

1mm滤纸

一块海绵(根据三明治的厚度选择是否使用)

正极(阳极)

注意:=1\*GB3①要彻底清除三明治结构中的气泡,适当补加1×快速转膜液保持三明治结构湿润。

=2\*GB3②PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿30秒。

=3\*GB3③三明治结构的制作不能太紧,也不能太松。太紧和太松都会影响转印效果。如果太紧的话,可以去除阳极一侧的海绵或滤纸。

5、将三明治结构放于转移槽中。

注:转移槽中可以不用1×快速转膜液,可以用1×TGS(Tris-Glycine-SDS)电泳缓冲液取代。三明治结构中的快速转膜液足够保证转膜的完成。

二、半干转(Semi-dryblot):

1、按照下表配制1×快速转膜液

2、将滤纸浸泡在1×快速转膜液中,完全浸湿。

3、将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2分钟,去除胶表面的SDS;随后将凝胶浸泡在1×快速转膜液中。

注意:水中漂洗时间一定不能超过2分钟,否则分子量较大的蛋白不能完全转移。

4按照以下顺序做好转印三明治结构:

负极(阴极)

下层滤纸

凝胶

转印膜

上层滤纸

正极(阳极)

半干转时,滤纸、胶、膜之间的大小,一般是下层滤纸=膜=胶=上层滤纸。上下两层的滤纸一定不能接触;滤纸、胶、膜之间千万不能有气泡。接触的滤纸和气泡会造成短路。

注意:PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿30秒。

三、转移条件:

推荐使用恒流转移

温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究

1
查看完整版本: 10快速转膜液说明书